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    抗原修復(fù)技術(shù)

    點(diǎn)擊次數(shù):1520  更新時(shí)間:2015-05-14


    盡管固定對于組織形態(tài)的保留是*的,但這一過程對IHC/ICC檢測也有不良影響。固定可能會(huì)改變蛋白的生化特性,如目的表位被掩蓋,或不再與一抗結(jié)合。表位的掩蓋可能是由氨基酸與表位的交聯(lián)、表位附近無關(guān)肽段的交聯(lián)、表位構(gòu)象的改變或抗原靜電荷的改變引起的??乖迯?fù)指的是逆轉(zhuǎn)表位掩蓋和恢復(fù)表位-抗體結(jié)合的技術(shù)。
     
    抗原修復(fù)技術(shù)
    抗原修復(fù)的需要取決于多個(gè)變量,包括但不限于,目的抗原、所使用的抗體、組織類型,以及固定方法和持續(xù)時(shí)間。多克隆抗體能識(shí)別多個(gè)表位,因此即使不進(jìn)行抗原修復(fù),它們也比單克隆抗體更有可能檢測到特定抗原。
    目前有多種技術(shù)可恢復(fù)表位的免疫反應(yīng)性。簡單的方法有改變抗體稀釋液的pH或陽離子濃度,這可能影響抗體與表位的親和力。對于部分掩蓋的表位,在開始抗原修復(fù)之前可以先試試改變一抗的孵育條件。不過,這一步也需要抗體濃度、孵育時(shí)間和溫度的進(jìn)一步優(yōu)化。在討論抗體修復(fù)方法時(shí),技術(shù)通常分為兩大類,蛋白酶誘導(dǎo)的表位修復(fù)(PIER)和熱誘導(dǎo)的表位修復(fù)(HIER)。一旦優(yōu)化好,抗原修復(fù)的影響可能是明顯的。
     
    蛋白酶誘導(dǎo)的表位修復(fù)(PIER)
    在PIER方法中,蛋白酶K、胰蛋白酶和胃蛋白酶等都曾成功恢復(fù)抗體與表位的結(jié)合。人們認(rèn)為作用機(jī)制是切割了可能遮蓋表位的肽段。PIER的缺點(diǎn)在于恢復(fù)免疫反應(yīng)性的成功率低,且有可能破壞組織形態(tài)和目的抗原。

    100148-199301  對照品 檢查 50mg
    100151-199202 吡哌酸 對照品 檢查 50mg
    100153-199603 潑尼松龍 對照品 含量測定 50mg
    100154-200501 腎上腺素 對照品 HPLC含量測定 100mg
    10155-0004 維生素D2 對照品 含量測定 50mg
    100156-200003 維生素K1 對照品 含量測定 50mg
    100158-200204 西咪替丁 對照品 鑒別 50mg
    0160-9602 鹽酸丙咪嗪 對照品 檢查 50mg
    100161-200503 鹽酸地爾硫卓 對照品 HPLC法含量測定 100mg
    100162-200302 鹽酸氟奮乃靜 對照品 TLC法檢查用 50mg
    100163-200405 鹽酸雷尼替丁 對照品 HPLC法含量測定 100mg
    100164-200402 鹽酸哌唑嗪 對照品 UV法含量測定 50mg
    100165-200103 鹽酸乙胺丁醇 對照品 檢查 50mg
    抗原100166-200502 鹽酸異丙腎上腺素 對照品 含量測定 50mg
    100167-199202 鹽酸左旋咪唑 對照品 檢查 50mg
    0169-9402 重酒石酸去甲腎上腺素 對照品 含量測定 100mg
    100170-200303 左旋多巴  對照品 HPLC法含量測定用 50mg
    100171-200503 醋酸甲地孕酮 對照品 含量測定 100mg

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