PCR試劑盒是從土壤農(nóng)桿菌CP4菌株中分離得到的抗除草劑草甘膦基因，是轉(zhuǎn)基因植物研究中較為常用的一種篩選標(biāo)記基因。
PCR試劑盒的使用注意事項(xiàng)有哪些：
注意事項(xiàng)一：保存
未拆封的試劑盒，請于-20℃保存；拆封之后，應(yīng)在4℃保存。
在試劑消耗量較少的實(shí)驗(yàn)室，可以考慮將按照組分單獨(dú)分裝，后保存在-20℃。
注意事項(xiàng)二：配置
試劑盒內(nèi)所含各組份都是混合物，在靜置情況下會(huì)發(fā)生分層現(xiàn)象，因此，現(xiàn)配現(xiàn)用，震蕩混勻，避免反復(fù)凍融，避免預(yù)混。其中，反復(fù)凍融將大幅縮短使用壽命。
在擴(kuò)增體系的選擇時(shí)，盡量選擇標(biāo)準(zhǔn)體系，再根據(jù)檢材情況加入模板，之后切勿忘記以PCR用水補(bǔ)足擴(kuò)增體系。
注意事項(xiàng)三：切勿預(yù)混
因試劑盒中酶的活性較高，將各組份按照比例混合之后，即使沒有達(dá)到它的較適溫度，但也可能發(fā)生與引物結(jié)合，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)丟位點(diǎn)或者雜合子純化等情況。
注意事項(xiàng)四：陰陽性參照
實(shí)驗(yàn)結(jié)果會(huì)受提取、擴(kuò)增和電泳等多個(gè)環(huán)節(jié)的影響，因此，每次擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)都應(yīng)該添加一組陰陽性參照。這樣，當(dāng)結(jié)果異常的時(shí)，我們就可以結(jié)合陰陽性參照的表現(xiàn)，排查問題出在哪個(gè)環(huán)節(jié)。
注意事項(xiàng)五：陽性參照是否通用
雖然多數(shù)試劑盒的陽性參照都是007，但是案件試劑盒和建庫試劑盒的陽性參照濃度不同，通常來說案件試劑盒的濃度更低。
注意事項(xiàng)六：擴(kuò)增程序
擴(kuò)增程序是能夠?qū)⒃噭┖懈笮馨l(fā)揮出來而設(shè)計(jì)，切勿隨意更改；再者，不同試劑盒所含酶的升溫模式也有不同，因此，在設(shè)置擴(kuò)增程序時(shí)，要選擇對應(yīng)的升溫模式。
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