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    植物ELISA試劑盒的原理和實(shí)驗(yàn)操作步驟說明

    點(diǎn)擊次數(shù):604次  更新時(shí)間:2023-01-15
       植物ELISA試劑盒的原理:
      樣品中的游離三聚氰胺與預(yù)包被在板子上的三聚氰胺蛋白偶聯(lián)物競爭結(jié)合酶標(biāo)記三聚氰胺抗體,通過洗滌洗掉未結(jié)合的酶標(biāo)記三聚氰胺抗體,再通過酶的專一性顯色劑顯色根據(jù)顯色的深淺來判斷樣品中三聚氰胺含量。根據(jù)競爭性原理,如果樣品中的游離三聚氰胺量少,則酶標(biāo)記的三聚氰胺抗體與包被在板子上的三聚氰胺偶聯(lián)物結(jié)合的多,顯色深,反之,則顯色淺。檢測時(shí)設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)曲線,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線測定樣品中三聚氰胺的含量。
     
      植物ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)操作步驟如下:
      1、標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可在小試管中進(jìn)行稀釋。
     
      2、加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
     
      3、溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
     
      4、配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
     
      5、洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
     
      6、加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑,空白孔除外。
     
      7、溫育:操作同3。
     
      8、洗滌:操作同5。
     
      9、顯色:每孔先加入顯色劑,再加入顯色劑,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘。
     
      10、終止:每孔加終止液,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
     
      11。、測定:以空白空調(diào)零,依序測量各孔的吸光度(OD值),測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
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