傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)和生長密度，當細胞生長密度達到80%~90%時，即可進行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現(xiàn)有70%~80%細胞收縮變圓、細胞間隙變大時，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細胞，輕輕吹打混勻，使細胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間，甚至進行細胞凍存。

AC16人心肌細胞

細胞基本屬性：

細胞詳細介紹：

二、懸浮細胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實驗室中懸浮細胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細胞碎片的情況下）。當在顯微鏡下觀察到懸浮細胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細胞懸液變黃）時，即可進行傳代。

（1）嚴格進行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時可用預(yù)實驗的方法選擇適當?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對于維持細胞生存，促進細胞生長起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻或預(yù)實驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實驗完成。

（4）消化細胞時應(yīng)避免消化時間過短導(dǎo)致消化不收集到的細胞數(shù)量少，或消化時間過長導(dǎo)致細胞成團塊樣絮狀游離，這時的細胞已有損傷或死亡，影響細胞數(shù)量和實驗進度。

（5）細胞離心的時候應(yīng)避免離心力過小收集的細胞數(shù)量不夠，或離心力過大對細胞產(chǎn)生損傷。離心后的細胞沉淀棄去上清后，應(yīng)先彈散細胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)毎麚p傷小，可以提高細胞活率。

（6）吹打細胞時應(yīng)盡量避免細胞的產(chǎn)生，以免損傷細胞，影響細胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

人真皮淋巴內(nèi)皮細胞裂解物HDLECL 小鼠α半乳糖基抗原(α-Gal)ELISA試劑盒 Selenoprotein W： 硒蛋白W抗體 P815 小鼠肥大細胞癌細胞

Promocell C-22120 Endothelial Cell GrowthMedium MV KIT, 內(nèi)皮細胞生長培養(yǎng)基MV套裝 500ml 小鼠α半乳糖基抗體(Gal)ELISA 試劑盒 SELS： 炎癥負調(diào)控因子蛋白抗體 CL-0447SW 1353(人骨肉瘤細胞)5×106cells/瓶×2

MDA-MB-435S(人導(dǎo)管癌細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠α白蛋白(AFM)ELISA試劑盒 Sema3A： 臂板蛋白3A抗體 人內(nèi)殼細胞(HHirSC)( 5×105 )

人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細胞;C918 小鼠αN已?；咸擒彰?span>(αNAG)ELISA試劑盒 SEMA4A： 跨膜蛋白SEMA4A抗體 人細胞;Hela 229 [HeLa229] 大鼠主動脈平滑肌細胞培養(yǎng)基 100mL

CSF2 Others Rat 大鼠 GM-CSF / CSF2 人細胞裂解液 (陽性對照) 小鼠αN已?；咸擒彰?span>(αNAG)ELISA 試劑盒 SEMA4B： 跨膜蛋白SEMA4B抗體 人癌細胞;MCF 7B

LH： 促黃體生成素抗體 CCL20 Others Mouse 小鼠 CCL20 / MIP-3 alpha 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

大鼠子宮平滑肌細胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠整合素α2(ITGα2)ELISA試劑盒 human IgM/RBITC 羅丹明標記人IgM 0.3ml

Laminin alpha 1： 層粘蛋白α1抗體 A-375 [A375], 人惡性黑素瘤細胞株 淋巴瘤細胞,U-937細胞 NCI-N87(人胃癌細胞)

IL20RB Others Rat 大鼠 IL20RB 人細胞裂解液 (陽性對照) 大鼠整合素α2(ITGA2)ELISA試劑盒 human IgA/RBITC 羅丹明標記人IgA 0.3ml

LETM1： LETM1蛋白抗體 tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-4C5

AC16人心肌細胞RK1(大鼠腎細胞) 5×106cells/瓶×2 人抗生長激素抗體(GHAb)ELISA 試劑盒 HGV(Hepatitis G vivus) 庚型肝炎病毒(抗原) 0.5mg

HAPLN2： 透明質(zhì)酸及粘蛋白2抗體 HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Egypt/ 3300-NAMRU3/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照)

Saos-2人成骨肉瘤細胞 Saos-2 human osteosarcoma cells McCOY's 5A+15%FBS 人抗腎小球基底膜抗體(GBM)ELISA 試劑盒 HisX6 聚組酸標簽蛋白 0.5mg

HAS3： 透明質(zhì)酸合成酶3抗體 狗腎細胞;Super Tube 胚胎成纖維細胞，3T6-Swiss albino細胞 Hed68細胞，果子貍腎上皮細胞

GIF Others Human 人 Gasic irinsic factor / GIF 人細胞裂解液 (陽性對照) 人抗腎小管基底膜抗體(TBM)ELISA 試劑盒 HIV gp120 艾滋病病毒(抗原) 0.5mg