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M-1小鼠腎集合管細胞(SV40轉化)

型 號

產品時間2024-12-05

所屬分類小鼠細胞系

報價1500

產品描述:M-1小鼠腎集合管細胞(SV40轉化)公司正在出售的產品:冰凍切片肥大細胞(MAST CELL)甲苯胺蘭
石蠟切片肥大細胞(MAST CELL)天青A(Azure A)(特異)
原位染色試劑盒
冰凍切片肥大細胞(MAST CELL)天青A(Azure A)
白細胞分類染色試劑盒

產品概述

M-1小鼠腎集合管細胞(SV40轉化)

細胞基本屬性:

產品名稱

M-1小鼠腎集合管細胞(SV40轉化)

組織來源

種屬

小鼠

生長特性

貼壁生長

細胞代數(shù)

10代以內

細胞形態(tài)

上皮細胞樣

使用權限A類

凍存條件

無血清凍存液,液氮儲存

細胞詳細介紹:

細胞別稱 M-1;小鼠腎集合管細胞(SV40轉化)

使用權限;A類

保藏單位;中國醫(yī)學科學院基礎醫(yī)學研究所細胞資源中心

背景簡介;M-1細胞源于tg(SV40E)Bri7轉基因小鼠的正常腎組織,含SV40病毒的DNA序列,保留了皮質集合管的某些特性,如形態(tài)和CCD(皮質結合管)抗原。大多M-1細胞的克隆具有皮質集合管中閏細胞或主細胞的特征;5%~10%的細胞有閏細胞和主細胞的雙重表型。當該細胞在滲透性支持物上生長時,可形成具有負跨膜電位差的腔樣結構。

細胞規(guī)格;1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測;無

培養(yǎng)基;D/F12+10% FBS+PS

培養(yǎng)條件;氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃

凍存條件無血清凍存液,液氮儲

發(fā)貨方式復蘇發(fā)貨(免運輸費用)/  凍存發(fā)貨(需加干冰運輸費用) 順豐快遞

供應限制僅限于科學研究,絕不可作為動物或人類疾病的治療產品使用

特別說明以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考,具體操作步驟以隨貨產品說明書為主

 

 

 



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二、懸浮細胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下:

一般實驗室中懸浮細胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法(培養(yǎng)液中含有細胞碎片的情況下)。當在顯微鏡下觀察到懸浮細胞已經長滿至80%~90%(細胞懸液變黃)時,即可進行傳代。

(1)嚴格進行無菌操作,所用一切試劑及耗材均應無菌,且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上,以免細胞發(fā)生污染。

(2)所用培養(yǎng)液必須適宜細胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細胞,對培養(yǎng)液的要求不一樣,必要時可用預實驗的方法選擇適當?shù)呐囵B(yǎng)液。

(3)胎牛血清對于維持細胞生存,促進細胞生長起著關鍵作用??筛鶕墨I或預實驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定,就應保持用至實驗完成。

(4)消化細胞時應避免消化時間過短導致消化不收集到的細胞數(shù)量少,或消化時間過長導致細胞成團塊樣絮狀游離,這時的細胞已有損傷或死亡,影響細胞數(shù)量和實驗進度。

(5)細胞離心的時候應避免離心力過小收集的細胞數(shù)量不夠,或離心力過大對細胞產生損傷。離心后的細胞沉淀棄去上清后,應先彈散細胞沉淀,再加入培養(yǎng)液重懸,這樣比直接吹打對細胞損傷小,可以提高細胞活率。

(6)吹打細胞時應盡量避免細胞的產生,以免損傷細胞,影響細胞狀態(tài)(吹打過程中殘留部分液體在吸頭內可以減少氣泡的產生)。

QQ截圖20240105153042.png

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傳代培養(yǎng)操作步驟:

一、貼壁培養(yǎng)

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下:

(1)傳代前在倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)和生長密度,當細胞生長密度達到80%~90%時,即可進行傳代。

(2)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次,左右輕輕搖晃后棄掉。

(3)根據培養(yǎng)瓶大小向瓶內加入適量含EDTA的,一般應覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。

(4)把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進行消化,2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進行觀察,當發(fā)現(xiàn)有70%~80%細胞收縮變圓、細胞間隙變大時,再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞脫落,然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化,使用吸頭輕輕吹打,混合均勻,以防消化過度。

(5)吸出所有細胞懸液至離心管內,1000rpm/min離心3~5min。

(6)棄上清,加入適量培養(yǎng)液重懸細胞,輕輕吹打混勻,使細胞均勻分散。

(7)用吸頭吸取適量細胞懸液,以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中,補足培養(yǎng)液,搖勻,放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

(8)根據細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間,甚至進行細胞凍存。


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